人脐静脉内皮细胞的介绍
1、基本成分介绍：内皮细胞培养添加剂(ECGS)是一种从牛脑垂体提取的培养基补充剂，含有培养血管内皮细胞所必需的生长因子、激素和蛋白质。
2、内皮细胞：用高倍镜观察肠系膜上的毛细血管，可见到内皮细胞，内皮细胞较间皮细胞小，排列紧密。内皮细胞或血管内皮是一薄层的专门上皮细胞，由一层扁平细胞所组成。
3、细胞接种：（1）、包被液：用去离水配制0.5%明胶溶液，过滤除菌。（2）、培养瓶包被：取2-4个T25培养瓶，每个培养瓶加2－3ml0.5%明胶溶液，摇匀使包被液布满培养瓶底面，置37℃2小时或放置过夜。
4、这是首次发现一种TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞中的初级应答基因，编码一个790个氨基酸的蛋白质，包含七个Cys2/Cys2-zinc指基序（3）的。
5、笔者最近在培养 人脐静脉血管内皮细胞 (Human Umbilical Vein Endothelial Cells，HUVEC)，记录一下细胞培养的一些基本操作。
6、分为原代的人脐静脉内皮细胞和细胞系/细胞株两种；前者基因型保持比较好，后者会丢失一些基因型，但是后者长得速度较快，二者做实验用的方向不一致。
求HUVEC细胞培养高手指导
1、(1)液体储存瓶：用于储存各种配制好的培养液、血清等液体，常以500ml、250ml、100ml生理盐水瓶或血浆瓶代替。
2、该补充剂最大限度地促进永生化的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）的生长，该因子的添加对维持永生化的人脐静脉内皮细胞（HUVEC）形态至关重要。
3、从37°C含5%CO2的培养箱中拿出细胞培养瓶， 首先观察培养瓶内的液体是否混浊 （混浊说明细胞可能被污染），然后镜下观察细胞生长情况，当细胞长满70%以上时，可以传代。
细胞培养基本操作
（1）无菌操作：细菌或霉菌污染是培养失败的常见原因，必须加强各个环节的无菌操作观念，以预防为主，一旦污染，一般很难消除。（2）培养液：所用的培养液必须满足细胞生存和生长的必要条件。
取动物胚胎或幼龄动物器官、组织。将材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用胶原蛋白酶）处理（消化），形成分散的单个细胞，将处理后的细胞移入培养基中配成一定浓度的细胞悬浮液。
（一）过程 原代培养的基本过程包括取材、培养材料的制备、接种及培养等步骤。原代培养的方法很多，基本和最常用的是组织块培养法和分离细胞法。
吸取培养基的吸管应离开培养瓶或试管口0.5cm，避免伸入培养瓶口或试管口；以防止细胞系的互相混杂污染。漏在培养瓶上或台上的液体，立即用酒精棉球擦净。1操作完毕后恢复工作台面。
请教HUVEC买细胞株好还是买原代的细胞好
1、请教HUVEC买细胞株好还是买原代的细胞好 原代细胞(primary cell) 是指从机体的组织(如人组织、小鼠组织、大鼠组织和兔组织等)经蛋白酶或其它的方法获得单个细胞并在体外进行模拟机体培养的细胞，称为原代细胞。
2、获取方法不同，原代细胞是指从机体取出后立即培养的细胞；细胞株是通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物；细胞系是原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。
3、来自allcells上海有限公司 总的来说，原代细胞的基因型保持的较好，细胞株基因型会有所丢失；细胞株生长较快，原代细胞较慢；细胞株较容易培养，原代细胞不易培养。
4、培养结果不同 原代培养细胞会分裂。原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了，细胞的生长就会出现停滞，大部分细胞衰老死亡。
如何正确复苏冻存huvec的细胞
1、从液氮中取出HUVEC的细胞管，快速将其置入37℃水浴中解冻，直到管中只剩下最后一片结晶（注意：不要让水没过产品管）。用75%的酒精擦拭产品管外壁。
2、适宜的降温速度是每分钟1℃降至-70℃后，立即投入液氮罐使速冷至-196℃，可耐长期保存。细胞的复苏是按一定复温速度将细胞悬液由冻存状态恢复到常温。在-70℃以下的条件下，细胞内的生化反应极其缓慢，甚至停止。
3、冻存的细胞从-80或者液氮拿出来后，立即放到37°C的温水中（注意冻存管内是否漏入液氮），融化之后， 350g 离心5min，弃上清，加入1ml ECM，吹匀细胞，加入25ml培养瓶，并补齐ECM到6ml。
